2024-07-05
柠檬酸发酵工艺流程研究论文
发布时间：2024-07-05 05:47:15
柠檬酸发酵工艺流程研究论文
柠檬酸是一种重要的有机酸，又名枸橼酸，无色晶体，常含一分子结晶水，无臭，有很强的酸味，易溶于水。其钙盐在冷水中比热水中易溶解，此性质常用来鉴定和分离柠檬酸。结晶时控制适宜的温度可获得无水柠檬酸。在工业，食品业，化妆业等具有极多的用途。天然柠檬酸在自然界中分布很广，天然的柠檬酸存在于植物如柠檬、柑橘、菠萝等果实和动物的骨骼、肌肉、血液中。人工合成的柠檬酸是用砂糖、糖蜜、淀粉、葡萄等含糖物质发酵而制得的，可分为无水和水合物两种。纯品柠檬酸为无色透明结晶或白色粉末，无臭，有一种诱人的酸味。很多种水果和蔬菜，尤其是柑橘属的水果中都含有较多的柠檬酸，特别是柠檬和青柠——它们含有大量柠檬酸，在干燥之后，含量可达8%（在果汁中的含量大约为47 g/L[3]）。在柑橘属水果中，柠檬酸的含量介于橙和葡萄的 mol/L和柠檬和青柠的 mol/L之间。这个含量随着不同的栽培种和植物的生长情况而有所变化1940年.克雷伯斯提出三羧循环学说以来，柠檬酸的发酵机理逐渐被人们所认识。已经证明，糖质原料生成柠檬酸的生化过程中，由糖变成丙酮酸的过程与酒精发酵相同，亦即通过E-M途径（二磷酸己糖途径）进行酵解。然后丙酮酸进一步氧化脱羧生成乙酰辅酶A，乙酰辅酶A和丙酮酸羧化所生成的草酰乙酸缩合成为柠檬酸并进入三羧循环途径。柠檬酸是代谢过程中的中间产物。在发酵过程中，当微生物体内的乌头酸水合酶和异柠檬酸脱氢酶活性很低、而柠檬酸合成酶活性很高时，才有利于柠檬酸的大量积累。
酵发酵有固态发酵、液态浅盘发酵和深层发酵 3种方法。固态发酵是以薯干粉、淀粉粕以及含淀粉的农副产品为原料，配好培养基后，在常压下蒸煮，冷却至接种温度，接入种曲，装入曲盘，在一定温度和湿度条件下发酵。采用固态发酵生产柠檬酸，设备简单，操作容易。液态浅盘发酵多以糖蜜为原料，其生产方法是将灭菌的培养液通过管道转入一个个发酵盘中，接入菌种，待菌体繁殖形成菌膜后添加糖液发酵。发酵时要求在发酵室内通入无菌空气。深层发酵生产柠檬酸的主体设备是发酵罐。微生物在这个密闭容器内繁殖与发酵。现多采用通用发酵罐。它的主要部件包括罐体、搅拌器、冷却装置、空气分布装置、消泡器，轴封及其他附属装置。发酵罐径高比例一般是1:，应能承受一定的压力,并有良好的密封性。除通用式发酵罐外，还可采用带升式发酵罐、塔式发酵罐和喷射自吸式发酵罐等。 为了得到产柠檬酸的优良菌种，通常是从不同地区采集的土壤或从腐烂的水果中分离筛选，然后通过物理和化学方法进行菌种选育。例如薯干粉深层发酵柠檬酸的菌种就是通过不断变异和选育得到的。菌种适合在高浓度下发酵，产酸水平较高。 柠檬酸的发酵因菌种、工艺、原料而异，但在发酵过程中还需要掌握一定的温度、通风量及pH值等条件。一般认为，黑曲霉适合在28～30℃时产酸。温度过高会导致菌体大量繁殖，糖被大量消耗以致产酸降低，同时还生成较多的草酸和葡萄糖酸；温度过低则发酵时间延长。微生物生成柠檬酸要求低pH，最适pH为2～4，这不仅有利于生成柠檬酸，减少草酸等杂酸的形成，同时可避免杂菌的污染。柠檬酸发酵要求较强的通风条件，有利于在发酵液中维持一定的溶解氧量。通风和搅拌是增加培养基内溶解氧的主要方法。随着菌体生成，发酵液中的溶解氧会逐渐降低，从而抑制了柠檬酸的合成。采用增加空气流速及搅拌速度的方法，使培养液中溶解氧达到60%饱和度对产酸有利。柠檬酸生成和菌体形态有密切关系，若发酵后期形成正常的菌球体，有利于降低发酵液粘度而增加溶解氧，因而产酸就高；若出现异状菌丝体，而且菌体大量繁殖，造成溶解氧降低，使产酸迅速下降。发酵液中金属离子的含量对柠檬酸的合成有非常重要的作用，过量的金属离子引起产酸率的降低, 由于铁离子能刺激乌头酸水合酶的活性，从而影响柠檬酸的积累。柠檬酸发酵用的糖蜜原料，因含有大量金属离子，必须应用离子交换法或添加亚铁氰化钾脱铁方能使用。然而微量的锌、铜离子又可以促进产酸
发酵工程论文
发酵工程是利用工业微生物的特定性状和功能，通过发酵过程来生产目的产物或将生物直接用于工业化生产的技术体系，是建立在发酵工业基础上，与化学工程紧密结合的一门学科，现在是我为您整理的发酵工程论文，希望对您有所帮助。
从多年发酵工程课程的讲授以及国内大部分高校发酵工程课程的讲授内容来看，发酵工程授课案例主要涉及到抗生素、氨基酸、柠檬酸等好氧发酵工艺及发酵机制，以及酒精、酿造酒、乳酸等厌氧发酵机制及工艺，很少涉及到基因工程产品如EGF、EPO、重组人乙肝疫苗等的发酵机制和工艺。生物技术药物已广泛用于治疗癌症、艾滋病、贫血、发育不良、糖尿病、心力衰竭、血友病、囊性纤维变性和一些罕见的遗传疾病[6]。目前我国从事生物技术药物产业研究与开发人数仅相当于美国的1/4，从事生物医药产品研究与开发的人才更是严重不足，已成为制约我国生物医药产业发展的瓶颈。这就要求我们编制、修订教学大纲时，在保留典型的传统菌的好氧发酵和厌氧发酵案例基础上，着重引入基因工程菌制药的发酵工艺，扩展学生的知识面，为他们将来到制药企业就业奠定良好基础。
1选取合适的教材
发酵工程优秀教材很多，像《微生物工程工艺原理》、《微生物工程》、《发酵工艺原理与技术》、《生物工艺学》、《现代工业发酵调控学》、《发酵工艺学》等，我们在前些年的教学过程中也选用了多个版本的《微生物工程》，结合我校生物技术专业学生的知识体系和培养方向，目前我们选用全国高等学校发酵工程专用教材、教育部普通高等教育“十一五”国家级规划教材华南理工大学姚汝华教授编写的《微生物工程工艺原理》，此书按照发酵工艺操作单元的先后顺序排布各章，脉络清晰，系统性好，该书在难易程度上很适合我们的学生，但是该书侧重于发酵机制的讲授，发酵工艺和设备没有涉及。因此，在前期教学积累的基础上，我们授课团队正在努力编写一本适合于我们自己的教材，增添发酵工艺及设备，以及基因工程产品的发酵工艺。同时为提高学习的广度和深度，为学生推荐了《发酵工艺原理》、《发酵设备》、《发酵工程实验技术》等参考书。
2开展发酵工程实验，提高学生综合素质
发酵工程是利用工业微生物的特定性状和功能，通过发酵过程来生产目的产物或将生物直接用于工业化生产的技术体系，是建立在发酵工业基础上，与化学工程紧密结合的一门学科，它是连接生命科学研究与应用的桥梁[7]。在基因工程和细胞工程的应用中，要想把定向改造的物种转化成产品，也需用到发酵工程技术。发酵工程实验开展的场所是发酵罐，这是发酵工业独有的特点，同时有一套严密的工艺流程让发酵原料通过菌种吸收转化成我们所需要的发酵产品，发酵周期长，步骤繁多。通过发酵工程实验课程的学习，培养学生实际动手操作能力，让学生亲自动手操作发酵罐，开展发酵罐空消和实消操作，以及常规发酵产品如酒精、柠檬酸、青霉素的发酵，使学生真正的达到学以致用，同时又锻炼了学生的自主性、创作性和责任心。师范院校的理科学生，普遍缺乏工艺概念，但他们又非常渴望了解真正的生产过程。我们针对发酵工程的主要内容，组织学生到啤酒厂、白酒厂、制药企业开展生产实习，使学生亲自到白酒、啤酒和药物的生产线上了解工艺流程，切切实实的把课堂上学到的理论知识与生产工艺联系起来，学生反映收获很大。总之，发酵工程实验集成度较高，牵涉到生物化学、微生物学、分析化学、有机化学、发酵工艺学、化学原理等学科的实验内容，有别于普通实验课程的是工厂生产实习，真正做到理论实践相结合，最终达到学以致用的培养目的。
3改进教学方法，切实提高学生创新能力
教学方法的改革，首先取决于教师本身的学术水平和综合素质的提高，教学方法改革服从人才素质培养，以大面积提高教学质量为目标，和教学内容的改革密不可分。生动、丰富的教材，有价值的有说服力的'理论，以培养学生学习和实践的态度、思维以及能力的开放式教学，无疑会激发学生的学习兴趣。从某种意义上说教学的目的是教会学生“学会学习”，“授人以鱼，不如授人以渔”。
案例教学
发酵工程是一门实验实践极强的学科，知识的归纳和总结是建立于具体的发酵机制和工艺案例的基础上。在授课过程中，典型的案例不仅使课堂生动形象，而且使学生容易理解和记忆，触类旁通，达到知识迁移的目的。例如在讲青霉素的发酵这部分内容时，通过详细讲解青霉素的发现，引出伟大的科学家弗莱明，进而讲解青霉素发酵的发酵机制、过程控制、提取及纯化相关内容，学生被激起兴趣，学起来也容易接受。学习之后，可以引导学生进行讨论，如抗生素的种类、我们生小病的时候用到了哪些抗生素、抗生素对能治疗那些疾病、滥用抗生素有何危害等等问题，使学生从思想上真正理解“抗生素是一把双刃剑”，从而在以后的生活中学以致用，进而影响身边的人及下一代合理利用抗生素，为社会进步做出贡献。
启发、讨论式教学
讲课的过程中首先讲授难点、重点，善于提出问题，让学生跟着老师的思路走，随着一个又一个的问题启发学生思考、归纳、总结。比如在讲授发酵过程的控制这部分内容开始时，引入酸奶的发酵。酸奶在生活中很普遍，同学们也不陌生，有的同学家做过酸奶，因此对酸奶的发酵还有一点常识，接受起来更容易一些。首先提出问题，酸奶发酵的原料和菌种从哪里来？酸奶发酵是好氧发酵还是厌氧发酵？发酵多长时间合适，夏天和冬天发酵时间一样吗？通过这些问题，启发学生思考讨论，最终引出酸奶的发酵工艺及注意事项，随后在实验课时让每位同学亲自动手做一款自己喜欢的酸奶，巩固和吸收理论学习。
比较归纳教学法
比较式教学法通过对不同知识点的对比分析，找到其相同和不同处，在比较的过程中对知识点归纳概括，有助于从本质上理解和记忆知识。比如在讲授培养基的制备过程中，让学生比较种子培养基与发酵培养基的相同点和不同点，说出两种培养基C/N比有何不同及不同的原因是什么。又比如在讲培养基的灭菌时，在讲述了分批灭菌和三种常见的连续灭菌流程连消塔——喷淋冷却流程、喷射加热——真空冷却流程、薄板热交换器连续灭菌流程之后，让学生对分批灭菌和连续灭菌进行对比总结，学生就容易理清楚，弄懂复杂的内容。
4优化考试模式，重在平时学习的思考与探讨
在发酵工程实验及理论教学考核方法中，一是包括到课情况。在开课之前详细向学生讲述发酵工程课程在生物技术专业的应用及其重要性，课程的讲授和考核方式，通过到课率来约束学生学习及实验的自觉性。二是考核内容和考核方式多样化，加强课堂考核、作业考核，平时考核与期末考核成绩的比例由原来的3∶7加大到6∶4，综合反映发酵工程课程实践性强的特色。三是实践教学实施“以考促训，以赛促练”，强化技能培养，规定技能考试不过关，不允许参加理论考试。四是在教学中注重因材施教和个性化培养。
5小结
当前生物技术飞速发展，发酵新产品不断涌出，它要求我们的发酵工程专业课教师在讲授传统知识的同时，不断学习发酵工程方面的前沿知识，及时根据发酵工程产品市场更新教学内容，同时在授课的过程中灵活采用各种教学方法，甚至有必要到工厂车间实习实训。从当前经济发展和高校改革趋势来看，生物技术专业不但在地方师范院校有很大的发展空间，而且也将是今后一些师范院校向综合型大学转型的必要环节。发酵工程课程作为生物技术专业的核心课程，是微生物学、生物化学、数学、计算机技术的应用，同时又是分子生物学、细胞工程、基因工程技术的深入开展，而生化工程、生物工业下游技术、微生物遗传育种技术又是发酵工程课程的深入和补充，因此发酵工程课程在生物技术专业承上启下，是一门非常重要的专业必修课程。所以，在当前转型发展大形势下，发酵工程课程教学改革势在必行，必须以培养学生观察问题、分析问题和解决问题的能力为目标，在开展理论教学基础上，切实开展实验教学和生产实习，最终培养出满足企业、市场和科研需要的优秀毕业生。
——安徽丰原集团改革创新纪实之二本报记者 周立文 温源面对挑战，技术创新才有出路拥有世界上最先进发酵技术的中国，也是柠檬酸生产大国。从70年代末开始，我国的柠檬酸生产以年均30％的速度增长，市场最好的时候，生产企业多达103家。1998年国内柠檬酸产量为40万吨，居全球首位，其中80％用于出口。然而在“大”的背后，是令人心酸的低效率和恶性竞争。在国际市场上，柠檬酸品牌被划分成三类，欧美产品属一类，以色列以及东欧诸国的产品属二类，中国和东南亚的产品属于三类。欧美是柠檬酸的主要消费地区，其柠檬酸生产也具有较强的竞争优势。我们的劣势主要体现在两个方面：其一、产业分散，难以形成规模效益。我国90％的企业年产量在3000吨以下，而国外的公司，如美国的ADM和卡吉尔、奥地利的荣格邦瓦拉、德国的拜尔、瑞典的罗氏等公司，年产量一般在数万吨以至10多万吨。其二是原料选择的缺陷。在1995年以前，国内普遍采用山芋干生产工艺，山芋干中的杂质不仅占用大量体积，而且常常造成倒罐，收率只有65％；同时，以山芋干为原料生产的柠檬酸产品白度低、易碳化合物高、质量难以保持稳定。面对挑战，技术创新才有出路。丰原的成功，有一半来自技术创新，丰原集团总经理李荣杰这样说。找到了“金色的玉米”丰原集团先后进行了三次大的技术改造，到1996年9月全部完成，蚌埠柠檬酸厂的生产能力从1994年的3000吨提高到2．8万吨。但企业要生存，还要不断地拿出新技术、新工艺。1994年以后，柠檬酸行业开始面临一个艰难的时期。原料价格上涨，柠檬酸售价下滑，国外提高柠檬酸的关税，金融危机雪上加霜——一个本来就很脆弱的行业，变得更加不堪一击。尚存的80多家企业，只有10多家维持正常生产。我国的柠檬酸行业，难道要步VC行业全军覆没之后尘？1994年以后的李荣杰和他的同事们，脑子里只有一个念头：抛弃山芋干！可是，抛弃山芋干以后怎么办？如果像境外企业那样，改用淀粉和白糖的下脚料，成本太高，我们显然无法与外国公司竞争。像希腊神话中寻找金羊毛的人一样，李荣杰们历尽艰辛，在各种原料中反复进行选择，终于找到了玉米。他们闯入了一个理论上的禁区。1988年的一本教科书说，用玉米做柠檬酸可以达到白糖的白度，但在工艺流程中必须把蛋白全部提取出来，这几乎是不可能的。国外专家也对玉米粉直接发酵生产柠檬酸判了“死刑”。李荣杰带领科研人员，全身心地投入科研，从理论实验到工业化生产，他们攻克了一个个技术难题；在不到半年的时间里，他们反复试验、充分论证，一举获得成功。丰原人绕过了禁区，完成了一次否定之否定。1995年，蚌埠柠檬酸厂获得了玉米粉一步法发酵柠檬酸国家重大发明专利。1996年美国《化学文摘》介绍了这一技术，在行业内引起震动。丰原集团总工程师薛培俭告诉记者，从山芋干到玉米粉，是一个飞跃。它使设备的生产能力提高了30％，再也不会出现倒罐的现象，总收率比1994年提高了22个百分点；发酵周期大大缩短，产品全部达到出口标准；其每吨产品成本下降了30％，低于国内同行1500元左右，低于国外同行近400美元；粮耗降13％，电耗降35％，水耗降65％；含糖废水COD降低了50％……同时，综合利用每吨柠檬酸新增产值1000余元。新工艺的开发，实现了利用廉价粗放原料达到甚至超过西方国家精料发酵的效果，使丰原集团的生产规模在三年内快速地扩大到6万吨，效益也连年翻番。怎样面对10：1丰原生化股份公司总经理许克强告诉记者，柠檬酸生产企业属于技术密集型和人力密集型相结合的企业，投入（包括环保投入）大，效益低。由于柠檬酸主要用于出口，所以这一产业面临的必然是国际竞争。欧美企业柠檬酸产量的固定资产投入每万吨在1亿美元左右，是国内企业的10倍以上。即将投产的丰原集团三期柠檬酸工程，其万吨生产能力的固定资产投入，只有5000万元。增加10倍以上的投入，这对国内企业来说是不可想象的。虽然我国的发酵技术比欧美高出一大截，但要提高柠檬酸的品质，还得依靠提取工艺的进一步提高。1995年，集团投资315万元组建了生物工程技术开发中心，聘请了一大批专家担任顾问，并与韩国、德国和以色列等国家的专家开展合作，研究柠檬酸的后期提取技术。又投资417万元建成中试工厂。他们承担的“玉米粉高糖发酵生产柠檬酸新工艺”课题，被列入国家“九五”科技攻关项目和国家工业化试验项目，从1997年底到现在，研究成果已进入中试阶段。如果这项新工艺投入生产，可以把产酸率再提高25％！丰原集团每年都要提取销售收入的2％—3％作为科研经费，近年来，丰原集团在科技开发方面已投入1355万元。回顾丰原集团走过的历程，李荣杰深有感触地说，当国内柠檬酸行业面临困境，多数企业濒临倒闭的情况下，丰原集团却依靠科技进步，为自己赢得了勃勃生机。这充分说明，一个企业要想永远立于不败之地，必须不断地实施技术创新战略。2本次技术改造工程生产工艺采用玉米为原料进行深层发酵,钙盐法提取生产柠檬酸.其工艺流程为原料玉米经过磨粉与淀粉酶混合后进行液化,使玉米转化为糖液,糖液经过滤后出去玉米渣.糖液与菌种送至发酵罐,在发酵罐中保持所需温度及不断搅拌下,通入无菌空气进行深层发酵,使糖液转化为柠檬酸,发酵完成后经过滤出去菌丝体.发酵液进入提取中和锅,与假如的碳酸钙反应生成柠檬酸钙晶体,该晶体送入碳解过内与硫酸反应,反应结束后经过滤,出去硫酸钙固体.液相为柠檬酸溶液送后工段进行精制造.溶液先经活性碳脱色,再经阳离子交换柱除去金属离子,再经阴离子交换柱出去酸离子后送入蒸发器加热浓缩,经三级真空蒸发浓缩后获得柠檬酸晶液,晶液经离心过滤得到湿柠檬酸液体,湿柠檬酸晶体再经震动硫化床以热风干燥,再经自动包装机定量装袋后入库待售.
酸奶发酵工艺研究论文
1. 响应曲面法优化黄参酸奶生产工艺.食品科学（CSCD核心库期刊），2011,32（12）：39-44（第一作者）2. 荷叶离褶伞菌丝体深层发酵及胞内外多糖含量的变化.中国酿造（CSCD核心库期刊），2011，230（5）：56-59（第一作者）3. 荷叶离褶伞子实体、菌丝体及发酵液蛋白质营养价值评价伤.菌物学报（CSCD核心库期刊），2010，29（4）：603-607（第三作者）4. 葡萄表面所得酵母的筛选及其鉴定.食品工业科技（CSCD核心库期刊），2010，31（6）：182-184（第二作者）5. 人参果酸奶制作工艺的研究.中国酿造（CSCD核心库期刊），2009，212（11）：167-169（第一作者）6.肉苁蓉多糖提取工艺及抑菌作用的研究.安徽农业科学（CSCD核心库期刊），2009，37（32）：15855-15856,15878（第一作者）7.极大螺旋藻酸奶加工工艺的研究.中国酿造（CSCD核心库期刊），2009，213（12）：155-158（第一作者）8.荷叶离褶伞子实体发酵液营养成分分析.食品科学（CSCD核心库期刊），2009，31（6）：155-157（第三作者）9.酿酒酵母菌的紫外诱变及其突变株的性能测定.中国酿造（CSCD核心库期刊），2009，211（10）：66-68（第二作者）10.荷叶离褶伞多糖的提取工艺及其抑菌作用的研究.中国食品工业，2009，(12)：51-53（第一作者）11.曼陀罗种子生物碱提取物抑菌活性的研究. 甘肃农业，2009，（5）：90--92（第一作者）12.”Ni2+“对大蒜根尖细胞有丝分裂的影响. 作物杂志（CSCD核心库期刊），2008，（1）：37-40（第一作者）13.黄花蒿不同溶剂提取液的抑菌作用研究，中国野生植物资源，2008，（3）：45-48（第一作者）通讯作者14.镉胁迫对红果龙葵幼苗生理生化的影响. 沈阳农业大学学报，2008，（2）：（第三作者）15.”Cd2+“对龙葵根尖细胞有丝分裂的影响. 河西学院学报，2007，（5）：48-50（第一作者）16.工业废水对黄瓜幼苗生长及叶片抗氧化系统的影响.干旱地区农业研究（CSCD核心库期刊），2006，24（4）：76-80（第三作者）
原理：酵母菌在无氧环境下繁殖生存材料：可以密封的瓶子（玻璃瓶还是其他瓶子你随意）酸奶、鲜奶步骤：将鲜奶加入瓶中约五分之四，其余部分用酸奶加满，密封完好保存在阴凉处两天左右，两天之后将瓶子打开，即可。 总结：酵母菌会在无氧条件下生存、繁殖，试验成功。
二、研究背景 随着人们生活水平的不断提高，酸奶作为一种营养保健食品受到了越来越多的人的青睐。面对市场上种类繁多的乳酸制品，既追求营养又讲求口味的我们对酸奶知道多少呢？为了深入了解酸奶 ，我们化学研究性小组对酸奶的由来、制作、营养价值，进行了一次研究。 三、研究主要内容与分析 （一）、酸奶的起源 酸奶源于保加利亚。很久以前，以游牧为主的色雷斯人常常背着灌满羊奶的皮囊随畜群在大草原上游荡。由于气温、体温及其他原因的作用，皮囊中的奶常变馊而成渣状。取少量变馊的奶倒入煮过的鲜奶中，一段时间后，鲜奶就变成了色雷斯人很喜欢的带有酸味的饮品。这即是最早的酸奶。 20世纪初，俄国科学家伊·缅奇尼科夫在研究人类长寿问题时，到保加利亚去作调查，发现每千名死者中有4名是百岁以上去世的。这些高龄人生前都爱喝酸奶。他断定喝酸奶是使人长寿的一个重要原因。经进一步研究，伊·缅奇尼科夫在酸奶中发现了一种能有效消灭大肠内腐败细菌的杆菌，并命名为“保加利亚乳酸杆菌”。伊·缅奇尼科夫对酸奶的研究成果使西班牙商人伊萨克·卡拉所受到启发，开始生产酸奶。第二次世界大战爆发后，伊萨克·卡拉索在美国建立了一家酸奶厂，很快酸奶便风靡世界。 （二）、制作酸奶使用菌种 型 号 菌种(中文名) 学 名 第一型(发泡型) Type I, Foamy Kefir Cultures 乳酸链球菌 凝乳链球菌 乳酪乳酸杆菌 高加索乳酸杆菌 嗜酸乳酸杆菌 积福圆酵母菌 脆性糖化酵母菌 Streptococcus lactis S. cremori Lactobacillus casei L. caucasicus L. acidophilus Torulopsis kefir Saccharomyces fragilis 2 第二型(乳酸型) Type II, Lactic Kefir Cultures 乳酸链球菌 凝乳链球菌 双乙醯乳酸杆菌 凝乳念珠球菌 植物乳酸杆菌 乳酪乳酸杆菌 嗜酸乳酸杆菌 佛罗伦糖化酵母菌 Streptococcus lactis S. cremori S. diacetylactis Leuconostoc cremoris Lactobacillus plantarum L. casei Saccharomyces florentinus （三）、酸奶的制作方法 酸奶一般是由牛奶做成的。牛奶是一种复杂的胶体混合物，是不透明的液体。奶里含有蛋白质、乳糖、钙质等物质。当在消毒的奶中加入发酵剂——乳酸菌时，乳酸菌就会在适宜的温度（30℃～40℃）中，大量生长繁殖，将牛奶中的乳糖分解成乳酸。因为乳酸中通报马奶中酷蛋白钙离子被夺走，这样一来，酷蛋白化合物就变得不稳定了，随着乳酸的酸度不断地增加，牛奶的性质逐渐发生了变化，当乳酸的PH值为时，酷蛋白就开始沉淀，凝结成酸牛奶。但这时的酸牛奶还很嫩，主要是产酸，这叫做前酵。这时可放入4℃～6℃的冷库中，由于奶的温度和酸度一时还降不下来，酸牛奶还在继续发酵，这叫做后发酵，主要是产芳香味。当后发酵完成后，便是我们饮用的酸牛奶了。 为了进一步了解酸奶的制作过程，我们实验组进行了酸奶的自制实验，方法如下： 1、取250毫升到1000升牛奶（约1—4袋市售鲜奶），也可以用奶粉调制牛奶。加热煮开，加糖。（也可不加糖）。冷却至40℃左右。（与体温相似，不烫手为合适）。倒入合适的干净的容器中或酸奶器中。 2、从冰箱取出1 袋发酵剂放在室温下15分钟至1小时，使其与室温平衡，（与煮奶同时进行，可以节省时间）撕开小袋，将发酵剂倒入牛奶中搅匀（注意：不要剧烈搅拌和不要搅出大量气泡）。放置40℃左右下发酵4-6小时。在发酵时不要摇动、震动和搅拌。以牛奶刚好凝固并出现少量乳清为发酵完成。喜欢吃酸一点的酸奶可以适当延长发酵时间。 3、将发酵好的酸奶取出，放入冰箱数小时或过夜。使乳酸菌停止生长并继续产生风味物质，使酸奶更醇厚、凝固的更完全。 4、从冰箱中取出后搅拌一下即可食用。在食用前可按个人的口味添加糖，也可加入果汁和果料。不能吃糖的人可加甜味剂或不加。怕冷的人可将酸奶放至室温后食用。 注意：发酵用的器具都应是干净的。并且用开水煮过或烫过。在操作是一定要注意卫生。以防止制作酸奶不洁。 在制作的过程中或多或少的会遇到许多的问题，我们为此列举了一些在制作的过程中常见的可能发生的问题和解决的办法： 1.牛奶不凝固 a.加入发酵剂时牛奶太烫，将菌种烫死。解决办法：下次将牛奶放凉。 b.牛奶或奶粉中含有抗菌素等抑菌物质，将菌种抑制。解决办法：更换牛奶或奶粉。 c.菌种因保存不当已经失活或过期。解决办法：更换发酵剂 2.牛奶凝固不完全 a.发酵时间不够。解决办法：延长发酵时间。 b.发酵时受到震动。解决办法：放在一个安静和稳定的地方发酵。 3.牛奶凝固后出水(乳清)过多 a. 牛奶太稀。解决办法：添加占原牛奶约2%的奶粉。 3 b.发酵时间太长。解决办法：注意发酵时间。 注意：1、当菌种选择不当或菌种单一，发酵温度不适合，发酵时间不够等原因致使酸奶的风味与香味不足。 2、菌种不纯或制作设备管道等被气菌污染，造成酸奶有气泡，口感发辣，如果被酵母菌污染则有馊味。 发酵时间与温度对酸奶也有很大的影响。我们对在不同的发酵时间与温度情况下制得的酸奶进行了实验，结果如下： 酸奶的营养含量是人们最注重的。我国新酸奶成分标准: 项目 纯酸奶 调味酸奶 果料酸奶 脂肪含量 全脂 部分 脱脂 ≤ 蛋白质含量 全脂、部分脱脂及脱脂 ≥ 非脂乳固体含量 全脂、部分脱脂 通过对酸奶的研究和相关资料的查寻了解到饮用酸奶具有以下优点： （1） 酸奶的营养价值颇高，比鲜奶更易于消化吸收，这是因为发酵乳中有活力强的乳酸菌，能增强消化．促进食欲．加强肠的蠕动和机体的物质代谢．因此经常饮用酸奶可以起到食疗兼收的作用、大大有利于增强人体的健康。 （2）饮用酸奶可克服乳糖不适应症。有一部分人对鲜奶中的乳糖有过敏症，进食鲜奶后发生腹泻、腹呜、消化不良症。新鲜的酸奶中存在乳糖酶活性，促进乳糖的分解，防止乳糖不耐症。因此，乳糖酶不充足的人，可以安心食用。 （3）酸奶可以降低胆固醇。酸奶中含有3－3羟一3甲基戊二酸和乳酸。常饮酸奶，可明显降低胆固醇，从而可预防老年人心血管疾病。 （4）酸奶对便秘和细菌性腹泻有预防作用。酸奶中产生的有机酸可增加肠蠕动，刺激胃液分泌，并抑制肠内有害病菌。 （5）酸奶能抑制癌。癌的发生主要是细胞的突变，即异常增殖。如何防止增殖就是对癌症预防的方法，许多动物试验证明，酸奶具有抑制癌细胞增殖作用，对治癌有一定的效果。 （6）酸奶具有美容作用。常饮酸奶能够润肤、明目、固齿、健发。其原囚是酸奶中含有丰富的钙，更易于消化吸收，利用率高。有益于牙齿，骨骼；酸奶中还有多种维生素，其中维生素A 和维生素B2都有益于眼睛；酸奶中丰富的氨基酸有益于头发；同时，由于酸奶能够改善消化功能，防止便秘，抑制有害物质如酚吲哚及胺类化合物在肠道内产生和积累，因而能防止细胞老化，使皮肤白晰而健美。 四、小结 发酵温度(℃) 培养时间及酸度(°T) 后酸化24h凝乳状态 8h 9h 30 80 89 凝乳质地良好,无乳清析出 40 74 78 87 凝乳质地良好,无乳清析出 42 78 87 凝乳质地良好,无乳清析出 45 80 89 凝乳质地较软,乳清析出较多 50 67 89 凝乳质地较软,乳清析出较严重。 4 以上调查研究报告，只是我们五位同学在课余时间内所做的一点粗浅的研究，这是我们进入高中阶段在综合实践活动课上的第一次尝试，其中有很多不足之处，希望老师和同学们给予指正。在此要感谢老师对我们精心指导和大力帮助，也对曾经帮助过我们的同学、老师、领导和社会上的热心人表示由衷的感谢！
酸奶的制作实验报告一、实验目的：了解酸奶加工的基本原理，学习酸奶简易的制作方法二、实验原理：酸奶是经乳酸发酵的乳制品，它以鲜奶为原料，经灭菌后，接种乳酸菌类发酵而成。由于乳酸菌利用了乳中的乳糖生成乳酸，升高了奶的酸度，当酸度达到蛋白质等电点时，酪蛋白因酸而凝固即成酸奶。三、实验器材：1菌种：酸奶2培养基：鲜奶3其他：发酵瓶、试管、移液管、小碗等四、实验方法：酸奶制作1料奶的质量：要求优质合格新牛奶或新鲜优质脱脂奶粉。2加糖：新鲜优质鲜奶加5-6%蔗糖（53g/1000ml）。3装瓶：在250ml的发酵瓶中装入牛乳200ml。装好后封口。4消毒：将装有牛乳的发酵瓶置于95°C水浴中消毒5min即可。5冷却：将已消毒过的牛奶冷却至40°C。6接种：以3-5%（8ml）接种量将市售乳接种入冷却至40°C的牛奶中，并充分混匀。7前发酵（培养）：把接种的发酵瓶置于40-45°C温箱中培养4h（准确培养时间视凝乳情况而定）。8后发酵（冷藏）：酸乳在形成凝块后应在4-7°C的低温下保持24h以上（称后熟阶段），以获得酸乳的特有风味和较好的口感。9品味：酸乳质量评定以品尝为标准，通常有凝块状态、表层光洁度、酸度及香味等数项指标，品尝时若有异味就可判定为酸乳污染了杂菌。五、品尝所制作的酸奶没有凝块，表层光洁度优良，味道不酸，开瓶有酸奶香味（味同卫岗酸奶）
柠檬酸检测方面的论文
营养学毕业论文参考文献
大学生活将要谢下帷幕，毕业论文是大学生都必须通过的，毕业论文是一种比较正规的检验大学学习成果的形式，快来参考毕业论文是怎么写的吧！以下是我整理的营养学毕业论文参考文献，供大家参考借鉴，希望可以帮助到有需要的朋友。
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生物传感器的研究现状及应用摘要：简述了生物传感器尤其是微生物传感器近年来在发酵工业及环境监测领域中的研究与应用，对其发展前景及市场化作了预测及展望。生物电极是以固定化生物体组成作为分子识别元件的敏感材料，与氧电极、膜电极和燃料电极等构成生物传感器，在发酵工业、环境监测、食品监测、临床医学等方面得到广泛的应用。生物传感器专一性好、易操作、设备简单、测量快速准确、适用范围广。随着固定化技术的发展，生物传感器在市场上具有极强的竞争力。 关键词：生物传感器；发酵工业；环境监测。中图分类号： 文献标识码：a 文章编号：1006-883x(2002)10-0001-06一、 引言 从1962年，clark和lyons最先提出生物传感器的设想距今已有40 年。生物传感器在发酵工艺、环境监测、食品工程、临床医学、军事及军事医学等方面得到了深度重视和广泛应用。在最初15年里，生物传感器主要是以研制酶电极制作的生物传感器为主，但是由于酶的价格昂贵并不够稳定，因此以酶作为敏感材料的传感器，其应用受到一定的限制。近些年来，微生物固定化技术的不断发展，产生了微生物电极。微生物电极以微生物活体作为分子识别元件，与酶电极相比有其独到之处。它可以克服价格昂贵、提取困难及不稳定等弱点。此外，还可以同时利用微生物体内的辅酶处理复杂反应。而目前，光纤生物传感器的应用也越来越广泛。而且随着聚合酶链式反应技术（pcr）的发展，应用pcr的dna生物传感器也越来越多。二、 研究现状及主要应用领域 1、 发酵工业各种生物传感器中，微生物传感器最适合发酵工业的测定。因为发酵过程中常存在对酶的干扰物质，并且发酵液往往不是清澈透明的，不适用于光谱等方法测定。而应用微生物传感器则极有可能消除干扰，并且不受发酵液混浊程度的限制。同时，由于发酵工业是大规模的生产，微生物传感器其成本低设备简单的特点使其具有极大的优势。(1). 原材料及代谢产物的测定微生物传感器可用于原材料如糖蜜、乙酸等的测定，代谢产物如头孢霉素、谷氨酸、甲酸、甲烷、醇类、青霉素、乳酸等的测定。测量的原理基本上都是用适合的微生物电极与氧电极组成，利用微生物的同化作用耗氧，通过测量氧电极电流的变化量来测量氧气的减少量，从而达到测量底物浓度的目的。在各种原材料中葡萄糖的测定对过程控制尤其重要，用荧光假单胞菌（psoudomonas fluorescens）代谢消耗葡萄糖的作用，通过氧电极进行检测，可以估计葡萄糖的浓度。这种微生物电极和葡萄糖酶电极型相比，测定结果是类似的，而微生物电极灵敏度高，重复实用性好，而且不必使用昂贵的葡萄糖酶。当乙酸用作碳源进行微生物培养时，乙酸含量高于某一浓度会抑制微生物的生长，因此需要在线测定。用固定化酵母（trichosporon brassicae），透气膜和氧电极组成的微生物传感器可以测定乙酸的浓度。此外，还有用大肠杆菌（）组合二氧化碳气敏电极，可以构成测定谷氨酸的微生物传感器，将柠檬酸杆菌完整细胞固定化在胶原蛋白膜内，由细菌―胶原蛋白膜反应器和组合式玻璃电极构成的微生物传感器可应用于发酵液中头孢酶素的测定等等。(2). 微生物细胞总数的测定在发酵控制方面，一直需要直接测定细胞数目的简单而连续的方法。人们发现在阳极表面，细菌可以直接被氧化并产生电流。这种电化学系统已应用于细胞数目的测定，其结果与传统的菌斑计数法测细胞数是相同的[1]。(3). 代谢试验的鉴定传统的微生物代谢类型的鉴定都是根据微生物在某种培养基上的生长情况进行的。这些实验方法需要较长的培养时间和专门的技术。微生物对底物的同化作用可以通过其呼吸活性进行测定。用氧电极可以直接测量微生物的呼吸活性。因此，可以用微生物传感器来测定微生物的代谢特征。这个系统已用于微生物的简单鉴定、微生物培养基的选择、微生物酶活性的测定、废水中可被生物降解的物质估计、用于废水处理的微生物选择、活性污泥的同化作用试验、生物降解物的确定、微生物的保存方法选择等[2]。2、 环境监测(1). 生化需氧量的测定生化需氧量（biochemical oxygen demand ?bod）的测定是监测水体被有机物污染状况的最常用指标。常规的bod测定需要5天的培养期，操作复杂、重复性差、耗时耗力、干扰性大，不宜现场监测，所以迫切需要一种操作简单、快速准确、自动化程度高、适用广的新方法来测定。目前，有研究人员分离了两种新的酵母菌种spt1和spt2，并将其固定在玻璃碳极上以构成微生物传感器用于测量bod，其重复性在±10%以内。将该传感器用于测量纸浆厂污水中bod的测定，其测量最小值可达2 mg/l，所用时间为5min[3]。还有一种新的微生物传感器，用耐高渗透压的酵母菌种作为敏感材料，在高渗透压下可以正常工作。并且其菌株可长期干燥保存，浸泡后即恢复活性，为海水中bod的测定提供了快捷简便的方法[4]。 除了微生物传感器，还有一种光纤生物传感器已经研制出来用于测定河水中较低的bod值。该传感器的反应时间是15min，最适工作条件为30°c，ph=7。这个传感器系统几乎不受氯离子的影响（在1000mg/l范围内），并且不被重金属（fe3+、cu2+、mn2+、cr3+、zn2+）所影响。该传感器已经应用于河水bod的测定，并且获得了较好的结果[4]。现在有一种将bod生物传感器经过光处理（即以tio2作为半导体，用6 w灯照射约4min）后，灵敏度大大提高，很适用于河水中较低bod的测量[5]。同时，一种紧凑的光学生物传感器已经发展出来用于同时测量多重样品的bod值。它使用三对发光二极管和硅光电二极管，假单胞细菌（pseudomonas fluorescens）用光致交联的树脂固定在反应器的底层，该测量方法既迅速又简便，在4℃下可使用六周，已经用于工厂废水处理的过程中[5]。(2). 各种污染物的测定常用的重要污染指标有氨、亚硝酸盐、硫化物、磷酸盐、致癌物质与致变物质、重金属离子、酚类化合物、表面活性剂等物质的浓度。目前已经研制出了多种测量各类污染物的生物传感器并已投入实际应用中了。测量氨和硝酸盐的微生物传感器，多是用从废水处理装置中分离出来的硝化细菌和氧电极组合构成。目前有一种微生物传感器可以在黑暗和有光的条件下测量硝酸盐和亚硝酸盐(nox-)，它在盐环境下的测量使得它可以不受其他种类的氮的氧化物的影响。用它对河口的nox-进行了测量，其效果较好[6]。硫化物的测定是用从硫铁矿附近酸性土壤中分离筛选得到的专性、自养、好氧性氧化硫硫杆菌制成的微生物传感器。在ph=、31℃时一周测量200余次，活性保持不变，两周后活性降低20%。传感器寿命为7天，其设备简单，成本低，操作方便。目前还有用一种光微生物电极测硫化物含量，所用细菌是，与氢电极连接构成[7]。最近科学家们在污染区分离出一种能够发荧光的细菌，此种细菌含有荧光基因，在污染源的刺激下能够产生荧光蛋白，从而发出荧光。可以通过遗传工程的方法将这种基因导入合适的细菌内，制成微生物传感器，用于环境监测。现在已经将荧光素酶导入大肠杆菌（）中，用来检测砷的有毒化合物[8]。水体中酚类和表面活性剂的浓度测定已经有了很大的发展。目前，有9种革兰氏阴性细菌从西西伯利亚石油盆地的土壤中分离出来，以酚作为唯一的碳源和能源。这些菌种可以提高生物传感器的感受器部分的灵敏度。它对酚的监测极限为5 ´10-9mol。该传感器工作的最适条件为：ph=、35℃，连续工作时间为30h[9]。还有一种假单胞菌属（pseudomonas rathonis）制成的测量表面活性剂浓度的电流型生物传感器，将微生物细胞固定在凝胶（琼脂、琼脂糖和海藻酸钙盐）和聚乙醇膜上，可以用层析试纸gf/a，或者是谷氨酸醛引起的微生物细胞在凝胶中的交联，长距离的保持它们在高浓度表面活性剂检测中的活性和生长力。该传感器能在测量结束后很快的恢复敏感元件的活性[10]。还有一种电流式生物传感器，用于测定有机磷杀虫剂，使用的是人造酶。利用有机磷杀虫剂水解酶，对硝基酚和二乙基酚的测量极限为100´10-9mol，在40℃只要4min[11]。还有一种新发展起来的磷酸盐生物传感器，使用丙酮酸氧化酶g，与自动系统cl-fia台式电脑结合，可以检测(32~96)´10-9mol的磷酸盐，在25°c下可以使用两周以上，重复性高[12]。最近，有一种新型的微生物传感器，用细菌细胞作为生物组成部分，测定地表水中壬基酚（nonyl-phenol etoxylate --np-80e）的含量。用一个电流型氧电极作传感器，微生物细胞固定在氧电极上的透析膜上，其测量原理是测量毛孢子菌属（trichosporum grablata）细胞的呼吸活性。该生物传感器的反应时间为15~20min，寿命为7~10天（用于连续测定时）。在浓度范围内，电信号与np-80e浓度呈线性关系，很适合于污染的地表水中分子表面活性剂的检测[13]。除此之外，污水中重金属离子浓度的测定也是不容忽视的。目前已经成功设计了一个完整的，基于固定化微生物和生物体发光测量技术上的重金属离子生物有效性测定的监测和分析系统。将弧菌属细菌（vibrio fischeri）体内的一个操纵子在一个铜诱导启动子的控制下导入产碱杆菌属细菌（alcaligenes eutrophus (ae1239)）中，细菌在铜离子的诱导下发光，发光程度与离子浓度成正比。将微生物和光纤一起包埋在聚合物基质中，可以获得灵敏度高、选择性好、测量范围广、储藏稳定性强的生物传感器。目前，这种微生物传感器可以达到最低测量浓度1´10-9mol[14]。还有一种专门测量铜离子的电流型微生物传感器。它用酒酿酵母（saccharomyces cerevisiae）重组菌株作为生物元件，这些菌株带有酒酿酵母cup1基因上的铜离子诱导启动子与大肠杆菌lacz基因的融合体。其工作原理，首先是cup1启动子被cu2+诱导，随后乳糖被用作底物进行测量。如果cu2+存在于溶液中，这些重组体细菌就可以利用乳糖作为碳源，这将导致这些好氧细胞需氧量的改变。该生物传感器可以在浓度范围()´10-3mol范围内测定cuso4溶液。目前已经将各类金属离子诱导启动子转入大肠杆菌中，使得大肠杆菌会在含有各种金属离子的的溶液中出现发光反应。根据它发光的强度可以测定重金属离子的浓度，其测量范围可以从纳摩尔到微摩尔，所需时间为60~100min[15][16]。用于测量污水中锌浓度的生物传感器也已经研制成功，使用嗜碱性细菌alcaligenes cutrophus，并用于对污水中锌的浓度和生物有效性进行测量，其结果令人满意[17]。估测河口出水流污染情况的海藻传感器是由一种螺旋藻属蓝细菌（ cyanobacterium spirlina subsalsa）和一个气敏电极构成的。通过监测光合作用被抑制的程度来估测由于环境污染物的存在而引起水的毒性变化。以标准天然水为介质，对三种主要污染物（重金属、除草剂、氨基甲酸盐杀虫剂）的不同浓度进行了测定，均可监测到它们的有毒反应，重复性和再生性都很高[18]。近来由于聚合酶链式反应技术（pcr）的迅猛发展及其在环境监测方面的广泛应用，不少科学家开始着手于将它与生物传感器技术结合应用。有一种应用pcr技术的dna压电生物传感器，可以测定一种特殊的细菌毒素。将生物素酰化的探针固定在装有链酶抗生素铂金表面的石英晶体上，用1´10-6mol的盐酸可以使循环式测量在同一晶体表面进行。用细菌中提取的dna样品进行同样的杂交反应并由pcr放大，产物为气单胞菌属（aeromonas hydrophila）的一种特殊基因片断。这种压电生物传感器可以鉴别样品中是否含有这种基因，这为从水样中检测是否含带有这种病原的各种气单胞菌提供了可能[19]。还有一种通道生物传感器可以检测浮游植物和水母等生物体产生的腰鞭毛虫神经毒素等毒性物质，目前已经能够测量在一个浮游生物细胞内含有的极微量的psp毒素[20]。dna传感器也在迅速的得到应用，目前有一种小型化dna生物传感器，能将dna识别信号转换为电信号，用于测量水样中隐孢子和其他水源传染体。该传感器着重于改进核酸的识别作用和加强该传感器的特异性和灵敏性，并寻求将杂交信号转化为有用信号的新方法，目前研究工作为识别装置和转换装置的一体化[21]。微藻素是一种从蓝藻细菌引起的水华中产生的细菌肝毒素，一种固定有表面细胞质粒基因组的生物传感器已经制得，用于测量水中微藻素的含量，它直接的测量范围是50~1000 ´10-6g/l[22]。 一种基于酶的抑制性分析的多重生物传感器用于测量毒性物质的设想也已经提出。在这种多重生物传感器中，应用了两种传导器―对ph敏感的电子晶体管和热敏性的薄膜电极，以及三种酶―尿素酶、乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶。该生物传感器的性能已经得到测试，效果较好[23]。除了发酵工业和环境监测，生物传感器还深入的应用于食品工程、临床医学、军事及军事医学等领域，主要用于测量葡萄糖、乙酸、乳酸、乳糖、尿酸、尿素、抗生素、谷氨酸等各种氨基酸，以及各种致癌和致变物质。三、 讨论与展望 美国的harold 指出，生物传感器商品化要具备以下几个条件：足够的敏感性和准确性、易操作、价格便宜、易于批量生产、生产过程中进行质量监测。其中，价格便宜决定了传感器在市场上有无竞争力。而在各种生物传感器中，微生物传感器最大的优点就是成本低、操作简便、设备简单，因此其在市场上的前景是十分巨大和诱人的。相比起来，酶生物传感器等的价格就比较昂贵。但微生物传感器也有其自身的缺点，主要的缺点就是选择性不够好，这是由于在微生物细胞中含有多种酶引起的。现已有报道加专门抑制剂以解决微生物电极的选择性问题。除此之外，微生物固定化方法也需要进一步完善，首先要尽可能保证细胞的活性，其次细胞与基础膜结合要牢固，以避免细胞的流失。另外，微生物膜的长期保存问题也待进一步的改进，否则难于实现大规模的商品化。 总之，常用的微生物电极和酶电极在各种应用中各有其优越之处。若容易获得稳定、高活性、低成本的游离酶，则酶电极对使用者来说是最理想的。相反的，若生物催化需经过复杂途径，需要辅酶，或所需酶不宜分离或不稳定时，微生物电极则是更理想的选择。而其他各种形式的生物传感器也在蓬勃发展中，其应用也越来越广泛。随着固定化技术的进一步完善，随着人们对生物体认识的不断深入，生物传感器必将在市场上开辟出一片新的天地。--------------------------------------------------------------------------------参考文献[1]韩树波，郭光美，李新等.伏安型细菌总数生物传感器的研究与应用[j].华夏医学，2000，63（2）：49-52 [2]蔡豪斌.微生物活细胞检测生物传感器的研究[j]. 华夏医学，2000，13（3）：252-256[3] trosok sp, driscoll bt, luong jht mediated microbial biosensor using a novel yeast strain for wastewater bod measurement[j]. applied micreobiology and biotechnology，2001， 56 (3-4): 550-554 [4] 张悦,王建龙，李花子等.生物传感器快速测定bod在海洋监测中的应用[j].海洋环境科学，2001，20(1)：50-54[5] yoshida n, mcniven sj, yoshida a, compact optical system for multi-determination of biochemical oxygen demand using disposable strips[j]. field analytical chemistry and technology，2001，5 (5): 222-227[6] meyer rl, kjaer t, revsbech np. use of nox- microsensors to estimate the activity of sediment nitrification and nox- consumption along an 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soldatkin ap, etc. multibiosensor based on enzyme inhibition analysis for determination of different toxic substances[j]. talanta,2001, 55 (5): 919-927the recent research and application of biosensorabstract: in this article, the recent research progress and application of biosensors ,especially the micro- biosensors, are reviewed, and the prospect of biosensors development is also prognosticated. biosensors are made up of bioelectrode , using immobile organism as sensitive material for molecule recognition, together with oxygen-electrode, membrane -eletrode and fuel-electrode. biosensors are broadly used in zymosis industry, environment monitor, food monitor and clinic medicine. fast, accurate, facilitate as biosensors is,there will be an excellent prospect for biosensors in the marketkeywords:biosensor, zymosis -industry, environment-monitor作者简介：何星月：中国科学技术大学生命科学院，合肥230027刘之景，中国科学技术大学天文与应用物理系教授，合肥230026电话：0551―3601895
下面是我查到的一个方法：柠檬酸合成酶测定缓冲液配制：样品缓冲液PH 100tris/HCl 50 mM gKCl 100mM gEDTA 1mM g储存液1 10mlacetyle-COA mM mg储存液2 10mloxaloacetate(OAA)5 mM mg储存液3 10mlDTNB mM mg步骤：520ul样品缓冲液+20ulDTNB+20ul acetyle-COA+20ul待测酶液，25℃温浴5min。加入20ulOAA立刻放入25℃恒温的分光光度计，在波长412nm测定3min(每30秒记录一次光密度)光密度变化值。在25℃作双份测定，取其均值为测定值，酶活力单位用U/min/g表示，其计算：U/min/g＝(Amin-A0)/min/mg（protein）。这个计算公式读得不太明白。该方法来自《缺氧及缺氧复合运动大鼠心肌_骨骼肌的适应性变化及机制》（博士论文，2005年，第三军医大学）
柠檬酸三辛酯毕业论文
品名：合成植物酯（通过SGS机构REACH 标准138项认证）价格低，增塑效果优异，不冒油，环保！合成植物酯是替代二辛酯（DOP）/二丁酯（DBP）或者ATBC/DOTP等增塑剂使用，节约资金资源的新型环保增塑剂。合成植物酯是一种新型环保增塑剂，是从多种植物里萃取，在一系列催化剂的作用下酯化生成的一种新型环保无毒增塑剂，合成植物酯用于PVC制品用量分别高达 55 份（100份树脂粉） 无析出现象。替代率在30%-100%之间。若与DOP、DBP配合使用，效果更佳。通过SGS机构ROHS、PAHs、17P、REACH认证。典型应用：合成植物酯被用作基于聚氯乙烯（PVC）、聚氨酯（PU）、天然橡胶（NR）、 苯橡胶（SBR）、丁腈橡胶（NBR）和氯丁橡胶（CR）的各种制品的增塑剂。颗粒类：电缆料颗粒、透明颗粒、软管颗粒搪塑类：搪塑玩具 （可出口欧盟等国家）蘸塑类：PVC类一次性手套和其他蘸塑类产品挤出类：汽车工业用的型材，连接件，管件，耐候和耐碱金属的型材以及吹塑膜注塑类：塑料凉鞋、泡沫凉鞋等注塑类发泡类：发泡软硬板、发泡拖鞋涂层类：人造革、充气类产品、防护布用涂料，雨衣，浴室踏垫等聚氨酯：PU人造革、保温材料等其 他：涂料、各种胶水 项 目 合成植物酯 DOP 色泽
主要从事精细化工的研究、开发和转化。主要成果有醇酸树脂催化剂（作为课题组成员，该课题通过山东省科委组织的技术鉴定，申报国家发明专利一项并被批准）、涤纶高速纺丝油剂（任题组长，该项目通过济南市科委组织的技术鉴定并在企业转化）、薄荷醇甘油醚（任课题组长，企业委托课题，该课题通过山东省科委组织的技术鉴定）、锦纶废水处理（任课题组长，企业委托开发课题，该课题通过山东省科委组织的技术鉴定、获山东省科技进步奖、申报国家发明专利一项）、医药中间体甲巯四氮唑（任技术负责人，该项目先后在本单位和企业转化）、杀菌防腐剂甲基异噻唑啉酮（任技术负责人，该课题通过山东省科技厅组织的技术鉴定，申报并获批国家发明专利一项）、防霉剂辛基异噻唑啉酮（任技术负责人，企业委托开发项目）、壳聚糖表面施胶剂（任项目负责人，该课题通过山东省科技厅组织的技术鉴定，申报国家发明专利二项）等等。有若干课题获得省市科技进步奖。另有学术论文和学术报告若干篇。2003年在杭州举行的全国首届防菌防霉剂学术交流会上作为特邀专家做了题为《杀菌防腐剂在造纸工业上的应用》的大会发言。2006年内退后，个人主要开展有机合成、塑料助剂-增塑剂（邻苯二甲酸二辛酯、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸二异丁酯、对苯二甲酸二辛酯、二甘醇二苯甲酸酯、柠檬酸三乙酯、柠檬酸三丁酯、乙酰柠檬酸三丁酯、环氧脂肪酸甲酯等）、粘合剂、聚丙烯酸钠分散剂、杀菌灭藻剂、阳离子表面活性剂（1227等）、水处理剂、农药和医药中间体等领域的研究和转化，成果分别在山东、江苏、浙江、福建、广东、湖南、河南等地转化，得到用户认可。2010年参加软课题研究并担任撰稿人。
啊，上次也是有人问，还说是高级脂肪酸，柠檬酸不算高级脂肪酸。你如果必须除异辛醇除气味，我感觉你们在反应时可以让柠檬酸过量，这样异辛醇反应就比较完全，然后除柠檬酸，而柠檬酸水溶性大，水洗除去效果应该好些，可以先做下试验。如果必须异辛醇过量，上次我是想用分子筛，也是可以考虑试用一下，选项择合适的孔隙的分子筛筛是可行的。 还有一点，你一定要加入一个其他不反应的溶剂，这样方便除干净。如果你就用异辛醇作溶剂，最后是难除尽。
柠檬酸三辛脂不是油脂原料。柠檬酸三辛脂通常是由柠檬酸和工业辛醇在催化剂和挟水剂作用下脂化而得粗品，可用于增塑剂。
柠檬酸检测方面的个人论文
匍匐翦股颖矮生品系耐阴性评价论文编号:SP027 论文字数:13264,页数:24摘 要 通过室内窗边培养和黑暗培养粤选1号匍匐翦股颖及矮生品系1613-01、1613-02、1613-4、1613-5、1613-6、1614-3、3603、3605-2，测定株高、根长、叶片长、分蘖数、生物量、叶片存活天数、叶片枯黄率、叶片老化指数等指标，以自然光照培养材料为对照，并进行草坪质量、草毯室内应用及草毯草种评分。结果说明，室内窗边培养和黑暗培养，匍匐翦股颖表现出徒长趋势，叶片增长、根短、分蘖少；叶色浅、枯黄，老化；生物量减少等。窗边培养的矮生品系1613-02、1613-4、1613-5、3603与粤选1号匍匐翦股颖相比，其株高、根长、生物量、叶片枯黄率、叶片老化指数变化值较小；黑暗培养的矮生品系1613-02、1613-4、1613-5、3603与粤选1号匍匐翦股颖相比，其株高、生物量、叶片老化指数变化值较小；匍匐翦股颖矮生品系1613-02在室内生长速度慢，植株存活能力强、并且具备较高的草坪和草毯质量，表现出最好的室内草毯应用潜力。关键词：匍匐翦股颖 矮生品系 草毯 耐阴性Evaluation of Shade-tolerance to Agrostis stolonifera Dwarf StrainsAbstract：The plant height, the length of roots and leaf, the number of tiller, biomass, survival time of leaf, rate of yellow leaf, leaf senescence index of Yuexuan No. 1 and new Agrostis stolonifera dwarf stain 1613-01、1613-02、1613-4、1613-5、1613-6、1614-3、3603、3605-2 were determined by cultivated beside windows indoor and in dark indoor. The results indicated that when cultivated beside windows indoor and in dark indoor, Agrostis stolonifera appeared a trend of excessive growth, and the length of leaf increased, the length of roots shortened, the number of tiller reduced, the color of leaf became light and yellow, the leaf became senescence, and the biomass was reduced, etc. Compared with Yuexuan , the change of plant height, the length of roots, biomass, rate of yellow leaf, leaf senescence index of Agrostis stolonifera dwarf strain 1613-02、1613-4、1613-5、3603 cultivated beside windows indoor were less. By cultivated in dark indoor, compared with Yue xuan No. 1, the change of plant height, biomass, rate of yellow leaf, leaf senescence index of Agrostis stolonifera dwarf strain 1613-4、1613-5、3603、3605-2 were less too. When Agrostis stolonifera dwarf strain 1613-02 was cultivated indoor, the growing speed was slow, and the survivability was strong. It was also became an excellent quality grass blanket, and expressed a best potential of grass blanket indoor application. Key words：Agrostis stolonifera; dwarf strain; grass blanket; shade-tolerance目 录1前言 12材料与方法 材料来源 材料培养 试验处理 指标测定 33结果与分析 不同光照培养对匍匐翦股颖矮生品系株高的影响 不同光照培养对匍匐翦股颖矮生品系植株根长的影响 不同光照培养对匍匐翦股颖矮生品系植株叶片长的影响 不同光照培养对匍匐翦股颖矮生品系植株分蘖数的影响 不同光照培养对匍匐翦股颖矮生品系植株生物量的影响 不同光照培养对匍匐翦股颖矮生品系植株叶片存活天数、叶片枯黄率、叶片老化 指数的影响 匍匐翦股颖矮生品系草毯室内应用株高变化 匍匐翦股颖矮生品系草坪质量指标评价 匍匐翦股颖矮生品系草毯质量评价与草种筛选 匍匐翦股颖矮生品系草种评分与各指标的相关性分析 154结论与讨论 15参考文献 17英文摘要 18致谢 19毕业论文成绩评定表 20以上回答来自:
下面是我查到的一个方法：柠檬酸合成酶测定缓冲液配制：样品缓冲液PH 100tris/HCl 50 mM gKCl 100mM gEDTA 1mM g储存液1 10mlacetyle-COA mM mg储存液2 10mloxaloacetate(OAA)5 mM mg储存液3 10mlDTNB mM mg步骤：520ul样品缓冲液+20ulDTNB+20ul acetyle-COA+20ul待测酶液，25℃温浴5min。加入20ulOAA立刻放入25℃恒温的分光光度计，在波长412nm测定3min(每30秒记录一次光密度)光密度变化值。在25℃作双份测定，取其均值为测定值，酶活力单位用U/min/g表示，其计算：U/min/g＝(Amin-A0)/min/mg（protein）。这个计算公式读得不太明白。该方法来自《缺氧及缺氧复合运动大鼠心肌_骨骼肌的适应性变化及机制》（博士论文，2005年，第三军医大学）
1卞有生;中国农业生态保护的现状、问题及对策[J];中国科技奖励;2000年04期;15-19 22 2卞有生,何军;生态省生态市及生态县标准研究[J];中国工程科学;2003年11期;22-28 3卞有生;生态示范区、生态县、生态市、生态省建设规划编制导则[J];环境保护;2003年10期;23-27 4卞有生;建设农业生态工程治理与控制湖泊面源污染[J];中国工程科学;2001年05期;19-23 5卞有生;中国农业生态工程的主要技术类型[J];中国工程科学;1999年02期;85-88 6卞有生;小型农业生态工程——庭院经济发展的数学模型[J];中国工程科学;2000年05期;62-67 7卞有生,刘来福,徐汝梅;中型农业生态工程的数学模型[J];中国工程科学;2001年11期;41-46 8卞有生,王天喜,陈正龙,崔斌;大型农业生态工程的数学模型[J];中国工程科学;2002年07期;19-24 34 9卞有生;农业生态工程中的价值流分析[J];环境科学;1999年04期;105-108 10马定渭,邹冬生,喻夜兰,戴诗慧;中国农业生态环境现状与恢复对策[J];湖南农业大学学报(社会科学版);2003年04期;8-12
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