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The Met大都会艺术博物馆大都会博物馆是美国最大的艺术博物馆，成立于1870年，位于纽约曼哈顿，藏品超过200万件，包括众多古典艺术品、古埃及艺术品、欧洲大师的油画及雕塑等。官网有超过40万张图片，还有书籍可以全本下载。The Tate泰特美术馆官网检索十分方便 包含400多个术语的定义，大部分都有插图，首字母分类几乎囊括所有你想了解的艺术概念。

《当代艺术》，Contemporary art，是由年轻艺术批评家、策展人戴卓群发起创办的杂志，由国内数十位著名批评家、策展人和学者担任学术顾问。

有，中国当代艺术是我在大学喜欢研究的课题之一，我常用的书籍是《中国当代艺术-现在与未来》《中国当代艺术年鉴 》《中国当代艺术史》《中国当代艺术文献》《中国当代艺术大家》《艺术的思考》《中国当代艺术与欧洲当代艺术比较》等等。 杂志类我常看的是《芭莎艺术》《当代艺术》《当代艺术与投资》《世界艺术》《艺术时代》《缪斯艺术》《艺术与投资》都是非常不错的杂志，不过有些网上订吧，书店很少有卖的。

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《当代》投稿须知： 编辑部： 投稿地址：北京市东城区朝内大街166号人民文学出版社《当代》邮编：100705 投稿邮箱：【只接收文学类作品（诗歌、散文除外）投稿，字数不限，投稿时请注明作者联系方式】《当代》杂志简介：《当代》（双月刊）创刊于1979年，由人民文学出版社主办。是第二届国家期刊奖获奖刊物，奉行文学克隆真实的宗旨，坚持以文学关注现实关注百姓人生的立场，被公认为现实感最强的中国大陆文学刊物。长期关注读者趣味，尊重读者权利，相信读者格调，成为发行量最大的文学原创期刊之一和最受欢迎提文学品牌之一。杂志的办刊方针是：注重作品的当代性、社会性、文学性；兼容百家，尤重现实主义。而于题材、风格和表现手法等诸方面，则更为注重对多样化的追求。20多年来，《当代》杂志刊发一大批对中国文坛产生了很大影响的文学作品。其中著名的“茅盾文学奖”获奖作品中，有近三分之一出自《当代》。

当代小学生杂志在官网可以看电子版。根据查询相关公开信息显示：《当代小学生》杂志创刊于1988年，一份以小学生为读者对象的综合性期刊，历次被评为山东省优秀期刊和华东地区优秀期刊。

好像还挺厉害的，练力华，男， 1953年生，大学毕业。 现任国际易学联合会（国家民政部注册、中国社会科学院主管）副会长兼易学应用研究会会长，《国际易学年鉴》杂志社社长，《国际易学年鉴》主编，中国专业人才库全国易学专业人才考评专家委员，北京大学相关研修班风水课程主讲教授，北京建设大学客座教授，中国人生科学学会国学院讲座教授，国际易学风水研究院第三任院长、现任首席总顾问，《国际易经》杂志原主编、现任名誉总编，中国风水学研究会会长，杨公风水元极门第三代传人。上世纪七十年代中期开始研易，对易学文化作全面研究，有较扎实的易学理论功底。在易学应用的研究方向主要在风水学（含择日学）专业，旁及命理、六爻、梅花易数、奇门、六壬、姓名、建筑学、城市规划学等专业。在风水学研究与实践上，对风水学的经、史、理、术作全面研究，颇有心得。尤其对阴宅的寻龙、点穴、定向、择日、作法，城市规划、开发区规划，以及阳宅的居屋、楼盘、工厂、写字楼、商场等风水选址、规划、设计；在阴阳宅风水调整改造中的催财、催丁、催文昌、催贵以及化煞等方面，有丰富的实践经验和综合操作的娴熟技术，并有大量成功案例，足迹踏遍祖国的大江南北。长期以来遵循理术并重、理论与实践相结合和博专兼具的修业原则，既重视理论研究，又反对空头理论；既重视技术和实践，又反对重术轻理、知其然不知其所以然、最终技术也难上乘的一般术士行为；既重视风水与择日上的“专”，又提倡兼修易学应用各专业的“博”的治学风格。练力华老师对传统风水学的完善和发展，可以简单归纳为以下几方面：（一）提出《青囊经》是风水学“根本大法”的理念。（二）提出了风水学“五位一体”的重要理论。（三）提出了“讲风水、写风水、断风水、做风水”要互相结合的重要理念。（四）传统风水学要走向现代化。（五）风水学要以人为本，扬弃结合，风水操作要全程全方位策划。（六）风水理气要兼收并蓄，主次结合的全新方法。2007年11月，练力华老师在深圳成功举办了全国性的《中国传统建筑文化论坛》，海内外420多位专家代表参加了大会，是多年来参会专家、易界名人到会最多的一次易学盛会。其会议质量、办会宗旨及会务管理，获得与会人员的高度评价，普遍认为，这次大会是难得一见的非常成功的易学大会。2014年11月，练老师又在深圳举办了“《中国环境地理学》首发式暨传统地理学术研讨会”，亦取得圆满成功。多年来，练力华老师经常被邀请到全国各地包括北京大学、中山大学、北京人民大会堂、各类风水与择日培训班讲学。其对风水文化的精辟见解，得到众多与会者、学生、弟子的普遍好评，其学生遍布西藏外的各省市及港澳台、美国、东南亚等，可谓桃李满天下。正式出版如下风水专著，广受读者好评：《玄空住宅环境学》，中国国际广播音像出版社2006年出版《居住时空选择学》，中国国际广播音像出版社2006年出版《和谐家居1——玄空住宅环境学》，中央广播电视大学出版社2008年出版《和谐家居2——居住时空选择学》，中央广播电视大学出版社2008年出版《中国环境地理学》（上下册），中央编译出版社2014年12月出版在杂志和大型学术研讨会上发表易学论文几十篇，获一等奖论文有：《生态健康地产与风水策划探讨》《健康地产的风水布局与策划方法》《中国风水的地理结构》《要重视峦头》《风水理气之辨》《风水择日之辨》《造葬择日漫谈》《易经的实用价值浅谈》《浅析风水文化与周易的亲缘关系》《我读青囊序》收起大家还在搜中华传奇期刊中华武术杂志官网《中华武术》杂志中华武术期刊官网中华武术期刊中华武术杂志在线阅读中华武术 研究版中医传奇中华武术杂志社电话中华名医名单中华武术研究杂志当代易经大师排名中华武术简介杨天才周易怎么样周仕强易经中华武术图片中华武术知网中华武术老版杂志中华武术杂志1982年全套中华武术杂志是学术期刊吗中华周易人物风云榜裘红祥中华周易人物风云榜杜新会八五年中华武术杂志杂志《武林》中华手搏术中医传奇人物建禄格的风云人物功勋人物手抄报国家功勋人物手抄报共和国功勋人物名单中华武术知网中华武术老版杂志中华武术杂志1982年全套中华武术杂志是学术期刊吗中华周易人物风云榜裘红祥中华周易人物风云榜杜新会八五年中华武术杂志杂志《武林》中华手搏术中医传奇人物建禄格的风云人物功勋人物手抄报 相关推荐中华周易人物风云榜——张涛|张艺怀_风水张涛自幼爱好中国传统文化,16岁开始跟随舅父学习风水及针灸,是其舅父的唯一弟子.曾师从白云寺主持德昌法师、盲派苏国胜大师、著名风水名师练力华、人生基因体系创始人刘...中华周易人物风云榜——梁真_中国中华周易人物风云榜——梁真 梁真,著名的命理及易学专家.出生于1949年5月,祖籍湖南常德,现定居珠海.中国易经文化协会名誉会长,中国十大风水名师,中国十大姓名学专家,中国河洛易学院特...中华周易人物风云榜——金雍闳_中国金雍闳:大学中文系毕业,国际易经科学研究院教授,现任中国易经协会副会长兼中国易经协会浙江办事处主任.2006年被评为“中国当代十大易学名人”,在北京人民大会堂接受全...中华周易人物风云榜——凌志轩_中国长期从事中国传统文化研究,擅长易经.其易学著作融象、数、理为一体,理术并重,以理论结合实践应用,把周易应用引入 经济领域,采用八卦的时空方位,选择最佳方案确定企业...中华周易人物风云榜——张一指_预测《周易》是中华文明智慧的结晶,被称为儒家六经之首,是对后世影响最深、最广、最长的思想、智慧宝典 . 1、《周易》溯源--周易与中华文化 自伏羲一画开天,取象八卦,周文王演卦,作卦辞、爻辞...相关搜索周仕强易经中华武术图片中华武术知网中华武术老版杂志中华武术杂志1982年全套中华武术杂志是学术期刊吗中华周易人物风云榜裘红祥中华周易人物风云榜杜新会八五年中华武术杂志杂志《武林》中华手搏术中医传奇人物建禄格的风云人物功勋人物手抄报

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2016-03-06 23:45中国水产养殖网 出处：当代水产

育苗业者鼓吹：市场规格在4两左右的攀鲈鱼价格约为20元/斤左右，2~3两左右的大约是16元/斤。

“三慢鱼”海南话就叫“Dam Man Bo,

海南话对应的汉字”三蛮婆“ ，Dam Man Wu

PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。下面是我整理的关于pcr技术论文，希望你能从中得到感悟!

技术的研究进展

摘要 PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。因其高强的特异性和灵敏度以及检测速度快、准确性好等优点，已被广泛地应用于水产、微生物检测等许多领域。该文从PCR技术的原理及应用方面进行了综述，并对其发展做出了展望。

关键词 PCR技术;研究进展;应用

中图分类号 Q819 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2012)10-0047-02

PCR(polymerase chain reaction，PCR)即聚合酶链式反应，它是一种体外酶促合成，扩增特定DNA片段的方法。1985年，美国Karray等学者首创了PCR技术，并由美国Cetus公司开发研制[1]。随着科学技术的发展和突破，PCR技术已在多个领域得到广泛地应用，如微生物检测、兽医学、水产养殖等方面。由于该技术具有较强的灵敏度、准确度和特异性，又能快速进行检测，因而其应用领域也在不断延伸[2-3]。随着PCR技术的不断发展，在常规PCR技术的基础上又衍生出了许多技术，如多重PCR(mutiplex PCR)技术[4]、实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR，FQ-PCR)技术[5]、单分子PCR技术[6]。

1 PCR技术原理

PCR技术是根据待扩增的已知DNA片段序列、人工合成与该DNA 2条链末端互补的2段寡核苷酸引物，在体外将待检DNA序列(模板)在酶促作用下进行扩增。PCR的整个技术过程经若干个循环组成，一个循环包括连续的3个步骤：第1步是高温条件下的DNA模板变性，即模板DNA在93~94 ℃的条件下变性解链;第2步是退火，即人工合成的2个寡核苷酸引物与模板DNA链3’端经降温至55 ℃退火;第3步是延伸，即在4种dNTP底物同时存在的情况下，借助TaqDNA聚合酶的作用，引物链将沿着5’-3’方向延伸与模板互补的新链[7]。经过这个循环后，合成了新链，可将其作为DNA模板继续反应，由此循环进行。循环进程中，扩增产物的量以指数级方式增加，一般单一拷贝的基因循环25~30次，DNA可扩增l00万~200万倍[1]。PCR反应的步骤很简单，但是具体的操作是复杂的，如退火温度的确定、延伸时间的长短以及循环数等。因此，不同的反应体系应该确定适当的反应条件，以避免假阴性或假阳性等情况的产生。

2 PCR技术的分类

在传统PCR技术的基础上，根据人们的需要以及各个领域的应用要求，又衍生出很多种类的PCR技术。新技术在各领域广泛应用并逐渐改进，为进一步的研究提供了基础。

实时荧光定量PCR技术

1996年，学者经过研究，在传统PCR技术的基础上，首创了实时荧光定量PCR技术，新技术已经应用至医学领域、分子生物学和其他基础研究领域。实时荧光定量PCR技术基于传统技术的优势，还具有实时性、准确性、无污染，实现了自动化操作和多重反应，是PCR技术研究史上从定性到定量的飞跃[8]。

荧光定量PCR技术最大的特点是能将荧光基团加入到PCR反应体系中，借助于荧光信号，累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析[9]。实时监测这一特点是常规PCR技术所不具有的，因为其对扩增反应不能进行随时的检测。常规PCR技术的扩增终产物需要在凝胶电泳等条件下才能进行，无法对起始模板进行准确的定量，而荧光定量PCR技术的反应进程可以根据荧光信号的变化做出准确的判断[10-11]。一个PCR循环反应结束之后，定量PCR仪可以收集1个荧光强度信号，荧光信号强度的变化可以反映产物量的变化情况，这样就可以得到1条荧光扩增曲线[12]。荧光信号在指数扩增阶段，PCR产物荧光信号的对数值与起始模板量之间存在线性对应关系，然后进行定量分析[13]。

多重PCR技术

多重PCR(mutiplex PCR)技术是PCR技术的一种，为同一管中加入多对特异性引物，与PCR管内的多个模板反应，在一个PCR管中同时检测多个目标DNA分子。多重PCR技术可以扩增一个物种的一个片段，也可以同时扩增多个物种的不同片段[14]。

在同一反应体系中，多重PCR技术进行多个位点的特异性扩增时，引物间的配对、引物间的竞争性扩增等会对扩增效果产生重要影响。一方面，如果能选择适宜的反应体系和反应条件，可极大地提高多重PCR的扩增效果[15]。主要包括退火温度、退火及延伸时间、PCR缓冲液成分、dNTP的用量、引物及模板的量等。另一方面，DNA的抽提质量也影响多重PCR扩增效率，如DNA抽提不干净或降解都将影响PCR扩增效果[16]。

单分子PCR技术(SM-PCR)

单分子PCR技术是在传统PCR技术的基础上发展的，基本循环过程相同，但在反应条件、模板数量、DNA 聚合酶选择、引物设计方面具有不同点。该技术是以少量或单个DNA分子为模板进行的PCR[17]。

单分子PCR技术反应中，DNA 模板浓度极低，这就要求模板有较高的质量。因为这是试验成败的决定性因素。在设计引物时，应该严格控制GC的含量和Tm值，同时尽量避免引物间存在可配对序列。在反应混合物模板数极低的情况下，若引物之间存在少量配对序列，扩增时极易形成二聚体，使反应无法进行，得不到所需要的产物[18]。由于单分子PCR技术反应的变性温度(96~98 ℃)大多比常规PCR技术(94 ℃)略高，因而对DNA 聚合酶热稳定性的要求也更加严格，需要有较好的热稳定性，以防止温度过高而使其失活。其变性时间(5~15 s)、退火时间及延伸时间也短于常规PCR技术[17]。

3 PCR技术的应用

PCR技术在水产上的应用

基因表达是检测某个基因在不同发育期或不同组织中的表达量变化，或受到某种试验处理过程中的影响而出现表达量变化的情况。有学者应用real-time PCR技术研究碳水化合物含量对翘嘴红鲴糖代谢酶G6Pase、GK以及PEPCK表达量的影响[19-21]，研究结果可为翘嘴红鲴饲料配方中的最合适糖含量提供理论依据。孙淑娜等[22]研究叶酸拮抗剂对斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2表达的影响，表明叶酸拮抗剂对早期胚胎的心脏发育影响较大，可导致斑马鱼心脏发育延迟及心脏形态异常，并下调斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2的表达，这可能是叶酸生物学活性受抑后导致心脏发育异常的机制之一。Sawyer et al[23]以斑马鱼的未受精卵、胚胎、仔鱼和成鱼为研究材料，采用实时荧光定量PCR技术，检测了P450aromA和P450aromB在不同组织的表达量，表明在各组织中均有2种基因的表达，但表达量显著不同，呈现组织特异性。

PCR技术在微生物检测上的应用

1990年，Bej et al[24]在利用多重PCR的方法检测了Leg-ionella类菌种和大肠类细菌，其结果是通过点对点方法固定的多聚dT尾捕捉探针和生物素标记的扩增DNA进行杂交来检测的。张志东等检测口蹄疫病毒(FMDV)持续性感染的带毒动物，表明实时荧光定量PCR技术具有快速检测、准确、客观等优势，较优于传统的检测方法[25-26]。Metzger-Boddien et al[27]对PCR-ELISA的方法进行了评价，结果显示，样品中沙门氏菌的检出率可以达到98%。

4 展望

传统PCR技术以及衍生出来的新型PCR技术自面世以来，已被广泛应用到生命科学的各个领域。随着技术方法的不断改进与完善，荧光定量PCR技术将会逐渐完善并广泛应用。多重PCR技术在食品病原微生物、非致病微生物及环境微生物检测中具有重要作用;未来的研究主要集中在去除食品抑制因子干扰、改进样品前处理技术等方面，其次是整合应用多重PCR与其他技术，必将在未来食品微生物检测中有非常好的应用前景。

5 参考文献

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亚健康，可理解为健康透支状态，即身体确有种种不适但又没有发现器质性病变状态。据分析，全国约有 45％的人群处于亚健康状态。在上海市中年高级知识分子中，有％的人处于“亚健康”状态，有一种或一种以上较严重疾病的占％，真正健康的人仅占5％。现代企业管理者中，由于整日操劳与应酬，处于亚健康状态的人更是高达85％以上。

1、过度疲劳造成的脑力、体力透支。由于生活工作节奏的加快、竞争日趋激烈，使人体主要器官长期处于入不敷出的超负荷状态，造成身心疲劳。表现为：疲劳困乏，精力不足，注意力分散，记忆力减退、睡眠障碍，颈、背、腰、膝酸，性机能减退等。

2、人体自然衰老。机体组织、器官不同程度的老化，表现为体力不支、精力不足、社会适应能力降低、更年期综合症、性机能减退、内分泌失调等。

3、心脑血管及其他慢性病的前期及恢复期和手术后康复期出现的种种不适，如胸闷气短、头晕目眩、失眠健忘、抑郁惊恐、心悸、无名疼痛、浮肿、脱发等.

4、人体生物周期中的低潮时期，表现为精力不足、情绪低落、困倦乏力、注意力不集中、反应迟钝、适应能力差等

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